Фосфатаза сілтілі (ALP)
Сипаттама
Сілтілік фосфатаза TAB5 генін тасымалдайтын рекомбинантты E. coli штаммынан алынған.Фермент ДНҚ және РНҚ фосфомоноэфирлерінің 5´ және 3´ ұштарының фосфорсыздануын катализдейді.Сондай-ақ ол рибозаны, сондай-ақ дезоксирибонуклеозидтрифосфаттарды (NTPs және dNTPs) гидролиздейді.TAB5 сілтілі фосфатаза 5´ шығыңқы, 5´ ойық және доғал ұштарға әсер етеді.Фосфатазаны ДНҚ немесе РНҚ фосфорланған ұштарын жою үшін клондау немесе зонд ұшын таңбалау сияқты көптеген молекулалық биология қолданбаларында қолдануға болады.Клондау эксперименттерінде дефосфорлану сызықты плазмидті ДНҚ-ның өздігінен байлануын болдырмайды.Ол сондай-ақ ДНҚ секвенциясы үшін үлгіні дайындау үшін ПТР реакцияларындағы біріктірілмеген dNTP-терді ыдыратуы мүмкін.Фермент 70°C температурада 5 минут қыздыру арқылы толығымен және қайтымсыз инактивацияланады, осылайша байлау немесе соңғы таңбалау алдында фосфатазаны жою қажет емес.
Қолданылуы
1. Белоктарға қосылған сілтілі фосфатаза (антиденелер, стрептавидин және т.б.) мақсатты молекулаларды нақты анықтай алады және ELISA, WB және гистохимиялық анықтауда қолданылуы мүмкін;
2.Сілтілі фосфатазаны ДНҚ немесе РНҚ-ның 5 '-терминалының өзін-өзі байланыстыруын болдырмау үшін фосфорсыздандыру үшін пайдалануға болады;
3. Жоғарыдағы фосфорсыздандырылған ДНҚ немесе РНҚ радиобелгіленген фосфаттармен белгіленуі мүмкін (Т4 полинуклеотидті киназа арқылы)
Химиялық құрылым
Техникалық сипаттама
| Сынақ элементтері | Техникалық сипаттамалар |
| Ферменттік белсенділік | 5U/мкл |
| Эндонуклеаза белсенділігі | Анықталған жоқ |
| Экзонуклеаза белсенділігі | Анықталған жоқ |
| Никинг әрекеті | Анықталған жоқ |
| RNase белсенділігі | Анықталған жоқ |
| E.coli ДНҚ | ≤1көшірме/5U |
| Эндотоксин | LAL-сынағы, ≤10EU/мг |
| Тазалық | ≥95% |
Тасымалдау және сақтау
Тасымалдау:Қоршаған орта
Сақтау:2-8°C температурада сақтаңыз
Ұсынылған қайта сынақӨмір:2 жыл
