Bst 2.0 ДНҚ полимераза (глицеринсіз, тығыздығы жоғары)
Bst ДНҚ полимераза V2 Bacillus stearothermophilus DNA Polymerase I-тен алынған, оның 5′→3′ ДНҚ полимераза белсенділігі және күшті тізбекті ауыстыру белсенділігі бар, бірақ 5′→3′ экзонуклеаза белсенділігі жоқ.Bst DNA Polymerase V2 тізбекті ауыстыру, изотермиялық күшейту LAMP (Loop mediated isothermal amplification) және жылдам реттілік үшін өте қолайлы.Бұл Bst ДНҚ полимераза V2 бөлме температурасында ДНҚ-полимераза белсенділігін тежеуге қабілетті, осылайша оны жұмыс істеуге және реакция жүйесін бөлме температурасында құрастыруға, спецификалық емес күшейтуге жол бермеуге және реакцияның тиімділігін арттыруға болады. лиофилизацияланады.Сонымен қатар, ол жоғары температурада өзінің белсенділігін босатуға қабілетті, осылайша бөлек белсендіру қадамының қажеттілігін жояды.
Құрамдас бөліктер
| Құрамдас | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
| Bst ДНҚ полимераза V2 (глицеринсіз) (32U/мкл) | 0,05 мл | 0,25 мл | 2,5 мл |
| 10×HC Bst V2 буфері | 1,5 мл | 2×1,5 мл | 3×10 мл |
| MgSO4 (100ммМ) | 1,5 мл | 2×1,5 мл | 2×10 мл |
Қолданбалар
1.LAMP изотермиялық күшейту
2.ДНҚ тізбегінің бір орын ауыстыру реакциясы
3.Жоғары GC генінің секвенциясы
4.Нанограмма деңгейіндегі ДНҚ секвенциясы.
Сақтау жағдайы
0°C төмен температурада тасымалдау және -25°C~-15°C температурада сақтау керек.
Бірлік анықтамасы
Бір бірлік 65°C температурада 30 минут ішінде қышқылда ерімейтін материалға 25 нмоль dNTP қосатын ферменттің мөлшері ретінде анықталады.
LAMP реакциясы
| Құрамдас бөліктер | 25 мклЖүйе |
| 10×HC Bst V2 буфері | 2,5 мкл |
| MgSO4 (100ммМ) | 1,5 мкл |
| dNTPs (әрқайсысы 10 мМ) | 3,5 мкл |
| SYTO™ 16 жасыл (25×)a | 1,0 мкл |
| Праймер қоспасыb | 6 мкл |
| Bst ДНҚ полимераза V2 (глицеринсіз) (32 U/uL) | 0,25 мкл |
| Үлгі | × мкл |
| ddH₂O | 25 мкл дейін |
Ескертулер:
1) а.SYTOTM 16 Green (25×): Эксперименттік қажеттіліктерге сәйкес басқа бояғыштарды алмастырғыш ретінде пайдалануға болады;
2) б.Праймер қоспасы: 20 μM FIP, 20 µM BIP, 2,5 µM F3, 2,5 µM B3, 5 µM LF, 5 µM LB және басқа көлемдерді араластыру арқылы алынған.
Реакция және жағдай
1 × HC Bst V2 буфері, инкубация температурасы 60°C және 65°C арасында.
Жылу инактивациясы
80°C, 20 мин.
