CHO HCP ELISA жинағы

Мысықтың №: HCP0032A

Пакет: 96Т

Бұл талдауда бір сатылы иммуносорбенттік ИФА әдісі қолданылады.Құрамында CHOK1 HCP бар үлгілер HRP таңбаланған ешкі анти-CHOK1 антиденелерімен және ELISA пластинасымен қапталған анти-CHOK1 антиденелерімен бір уақытта әрекеттеседі.

Сұрау жіберу

Өнім Сипаттамасы

Өнім күні

Бұл талдауда бір сатылы иммуносорбенттік ИФА әдісі қолданылады.Құрамында CHOK1 HCP бар үлгілер HRP-таңбаланған ешкі анти-CHOK1 антиденелерімен және ELISA пластинасымен қапталған анти-CHOK1 антиденелерімен бір уақытта әрекеттеседі, соңында қатты фазалық антиденелер-HCP-таңбаланған антиденелердің сэндвич кешенін құрады.Байланбаған антиген-антиденені ELISA пластинасын жуу арқылы жоюға болады.ТМБ субстраты жеткілікті реакция үшін ұңғымаға қосылады.Түстің дамуы тоқтату ерітіндісін қосқаннан кейін тоқтатылады және 450/650 нм реакция ерітіндісінің OD немесе сіңіру мәні микропластинаны оқу құралымен оқылады.OD мәні немесе сіңіру мәні ерітіндідегі HCP мазмұнына пропорционал.Осыдан стандартты қисық бойынша ерітіндідегі HCP концентрациясын есептеуге болады.

Алдыңғы: Тінтуірдің генотиптеу жинағы HCR2021A

Келесі: Екі тізбекті РНҚ (dsRNA) ELISA KIT HCP0033A

Қолдану

Бұл жинақ үлгілердегі CHOK1 хост жасушасының ақуыз қалдықтарының мазмұнын сандық анықтау үшін пайдаланылады.

Cқарсыластар

S/N	Құрамдас	Шоғырлану	Сақтау шарттары
1	CHOK1 HCP стандарты	0,5 мг/мл	≤–20℃
2	Анти-CHO HCP-HRP	0,5 мг/мл	≤–20℃, жарықтан қорғаңыз
3	TMB	NA	2-8℃, жарықтан қорғаңыз
4	20 × PBST 0,05%	NA	2-8℃
5	Шешімді тоқтату	NA	RT
6	Микропластиналық тығыздағыштар	NA	RT
7	BSA	NA	2-8℃
8	Жоғары адсорбциялық алдын ала жабатын тақталар	NA	2-8℃

Қажетті жабдық

Шығын материалдары / Жабдық	Өндіріс	Каталог
Микропластинаны оқу құралы	Молекулалық құрылғылар	Spectra Max M5, M5e немесе баламасы
Термомиксер	Эпендорф	Eppendorf/5355 немесе баламасы
Құйынды араластырғыш	IKA	MS3 Сандық немесе баламасы

Сақтау және тұрақтылық

1.-25~-15°C температурада тасымалдау.

2.Сақтау шарттары 1-кестеде көрсетілгендей;1-2 құрамдас бөліктер ≤–20°C сақталады, 5-6 RT сақталады,3、4、7、8 2-8℃ температурада сақталады;жарамдылық мерзімі 12 ай.

Өнімнің параметрлері

1.Сезімталдық: 1нг/мл

2.Анықтау диапазоны:3- 100нг/мл

3.Дәлдік: талдау ішілік CV≤ 10%, талдау аралық CV≤ 15%

4.HCP қамтуы: >80%

5.Ерекшелік: Бұл жинақ әмбебап болып табылады, өйткені ол тазарту процесіне тәуелсіз CHOK1 HCP-мен әрекеттеседі.

Реагент дайындау

1.PBST 0,05%

15 мл 20×PBST 0,05%, ddH сұйылтылған алыңыз₂О, және 300 мл дейін.

2.1,0% BSA

Бөтелкеден 1 г BSA алыңыз және 100 мл PBST 0,05% сұйылтыңыз, толығымен ерігенше жақсылап араластырыңыз және 2-8 ° C температурада сақтайды.Дайындалған сұйылту буфері 7 күн бойы жарамды.Қажет болса, оны дайындау ұсынылады.

3.Анықтау ерітіндісі 2мкг/мл

48 мкл 0,5 мг/мл Anti-CHO HCP-HRP алыңыз және 2 мкг/мл анықтау ерітіндісінің соңғы концентрациясын алу үшін 11,952 мкл 1% BSA сұйылтыңыз.

4.QC және CHOK1 HCP стандарттарын дайындау

Түтік Жоқ.	Түпнұсқа толтыру	Шоғырлану нг/мл	Көлемі мкл	1% BSA Көлемі мкл	жалпы көлемі мкл	Финал шоғырлану нг/мл
A	Стандартты	0,5 мг/мл	10	490	500	10 000
B	A	10 000	50	450	500	1000
S1	B	1000	50	450	500	100
S2	S1	100	300	100	400	75
S3	S2	75	200	175	375	40
S4	S3	40	150	350	500	12
S5	S4	12	200	200	400	6
S6	S5	6	200	200	400	3
NC	NA	NA	NA	200	200	0
QC	S1	100	50	200	250	20

Кесте: КС және стандарттарды дайындау

Талдау процедурасы

1.Жоғарыдағы «Реактивті дайындау» бөлімінде көрсетілгендей реагенттерді дайындаңыз.

2.Әрбір ұңғымаға 50 мкл стандарттарды, үлгілерді және QC (3-кестені қараңыз) алыңыз, содан кейін 100 мкЛ Анықтау ерітіндісін (2 мкг/мл) қосыңыз;Пластинаны тығыздағышпен жабыңыз және ELISA пластинасын термомиксерге салыңыз.500 айн/мин, 25±3℃ 2 сағат бойы инкубациялаңыз.

3.Раковинадағы микропластинаны төңкеріп, жабын ерітіндісін тастаңыз.ELISA пластинасын жуу және ерітіндіні тастау үшін әрбір шұңқырға 300 мкЛ PBST 0,05% тамшуырмен тамызыңыз және жууды 3 рет қайталаңыз.Пластинаны таза қағаз сүлгіге аударып, құрғатыңыз.

4.Әрбір ұңғымаға 100 мклTMB субстратын қосыңыз (1-кестені қараңыз), ELISA пластинасын жабыңыз және қараңғы жерде 25±3℃ температурада 15 минут бойы инкубациялаңыз.

5.Әр шұңқырға 100 мкл тоқтату ерітіндісін тамызыңыз.

6.Микропластинаны оқу құралымен 450/650 нм толқын ұзындығында сіңіруді өлшеңіз.

7.Деректерді SoftMax немесе баламалы бағдарламалық құрал арқылы талдаңыз.Төрт параметрлі логистикалық регрессия үлгісін қолдану арқылы стандартты қисық сызбаны салыңыз.

Стандартты қисық мысал

ЕСКЕРТПЕ: Үлгідегі HCP концентрациясы стандартты қисық сызығының жоғарғы шегінен асып кетсе, оны сынау алдында сұйылту буферімен дұрыс сұйылту керек.

ЕСКЕРТПЕЛЕР

Тоқтатқыш ерітінді 2М күкірт қышқылы, шашырауды болдырмас үшін абайлап ұстаңыз!