One Step Fast RT-qPCR Probe Premix-UNG
Мысықтың №: HCR5143A
Бір қадамды RT-qPCR зонд жинағы (FOR FAST) — үлгі ретінде РНҚ (РНҚ вирусы сияқты) пайдаланатын бір плексті немесе мультиплексті сандық ПТР үшін жарамды зонд негізіндегі RT-qPCR жылдам анықтау жинағы.Бұл өнімде жылдам күшейту үшін оңтайландырылған буфері бар антиденелермен модификацияланған Taq DNA Polymerase және бір сатылы арнайы кері транскриптазаның жаңа буыны пайдаланылады, оның күшейту жылдамдығы жоғарырақ, күшейту тиімділігі мен ерекшелігі жоғары.Ол қысқа уақыт ішінде төмен және жоғары концентрациялы үлгілердің бір және мультиплексінде теңдестірілген күшейтуді қолдайды.
Құрамдас бөліктер
1. 5×RT-qPCR буфері (U+)
2. Фермент қоспасы (U+)
Ескертулер:
а.5×RT-qPCR буфері (U+) dNTP және Mg қамтиды2+;
б.Фермент қоспасы (U+) кері транскриптазаны, Hot Start Taq ДНҚ полимеразасын, RNase тежегішін және УДГ қамтиды;
в.RNase-Free кеңестерін, EP түтіктерін және т.б. пайдаланыңыз.
Қолданар алдында 5×RT-qPCR буферін (U+) мұқият араластырыңыз.Егер ерігеннен кейін жауын-шашын болса, буфердің бөлме температурасына оралуын күтіңіз, араластырыңыз және ерітіңіз, содан кейін оларды қалыпты түрде пайдаланыңыз.
Сақтау шарттары
Өнім құрғақ мұзбен жеткізіледі және оны -25~-15℃ температурада 1 жыл сақтауға болады.
Нұсқаулар
1. Реакция Жүйе
| Құрамдас бөліктер | Көлемі (20 мкл реакция) |
| 2 ×RT-qPCR буфері | 4 мкл |
| Фермент қоспасы (U+) | 0,8 мкл |
| Primer Forward | 0,1~ 1,0мкМ |
| Праймер кері | 0,1~ 1,0мкМ |
| TaqMan зонд | 0,05~0,25мкМ |
| Үлгі | X мкл |
| РНазсыз су | 25 мкл дейін |
Ескертулер: Реакция көлемі 10-50 мкл.
2. Cycling Protocol (Sстандарт)
| Цикл қадам | Темп. | Уақыт | Циклдер |
| Кері транскрипция | 55 ℃ | 10 мин | 1 |
| Бастапқы денатурация | 95 ℃ | 30 сек | 1 |
| Денатурация | 95 ℃ | 10 сек | 45 |
| Күйдіру/кеңейту | 60 ℃ | 30 сек |
| Велосипедпен жүру протоколы (Жылдам) Цикл қадам |
Темп. |
Уақыт |
Циклдер |
| Кері транскрипция | 55 ℃ | 5 мин | 1 |
| Бастапқы денатурация | 95 ℃ | 5 с | 1 |
| Денатурация | 95 ℃ | 3 с | 43 |
| Күйдіру/кеңейту | 60 ℃ | 10 с |
Ескертулер:
а.Кері транскрипция температурасы 50 ℃ - 60 ℃ арасында, температураны арттыру күрделі құрылымдарды және жоғары CG мазмұн үлгілерін күшейтуге көмектеседі;
б.Оңтайлы күйдіру температурасын праймердің Tm мәніне қарай реттеу керек және нақты уақыттағы ПТР құралы негізінде флуоресценция сигналын жинау үшін ең қысқа уақытты таңдау керек.
Ескертпелер
Сіздің денсаулығыңыз бен қауіпсіздігіңізді қамтамасыз ету үшін қажетті ЖҚҚ, зертханалық халат пен қолғап киіңіз!
