2×ПТР мастер-миксі (бояусыз)
ПТР Мастер Микс – қолдануға дайын кәдімгі ПТР алдын ала араластырылған ерітінді, оның ішінде Taq DNA Polymerase, dNTP mix MgCl2 және оңтайландырылған буфер.Реакция кезінде күшейту үшін тек праймер мен шаблонды қосуға болады, бұл тәжірибенің операциялық қадамдарын айтарлықтай жеңілдетеді.Бұл өнімде тамаша тұрақтандырғыштар бар және оны 4℃ температурада 3 ай бойы сақтауға болады.ПТР өнімінде 3′-дА шығуы бар және оны Т векторына оңай клондауға болады.
Сақтау шарттары
Өнімді -25℃~ -15℃ температурада екі жыл бойы сақтау керек.
Техникалық сипаттамалар
| Адалдық (Taq қарсы) | 1× |
| Ыстық бастау | No |
| Аспалы | 3′-А |
| Полимераз | Так ДНҚ полимераза |
| Реакция пішімі | SuperMix немесе Master Mix |
| Реакция жылдамдығы | Стандартты |
| Өнім түрі | ПТР мастер-миксі (2×) |
Нұсқаулар
1.Реакция жүйесі
| Құрамдас бөліктер | Өлшем (мкл) |
| Үлгі ДНҚ | Қолайлы |
| 1-праймер (10 мкмоль/л) | 2 |
| 2-праймер (10 мкмоль/л) | 2 |
| ПТР мастер-микс | 25 |
| ddH2O | 50-ге дейін |
2.Күшейту хаттамасы
| Цикл қадамдары | Температура (°C) | Уақыт | Циклдер |
| Алдын ала денатурация | 94 ℃ | 5мин | 1 |
| Денатурация | 94 ℃ | 30 сек | 35 |
| Күйдіру | 50-60 ℃ | 30 сек | |
| Кеңейтім | 72 ℃ | 30-60сек/кб | |
| Соңғы кеңейтім | 72 ℃ | 10мин | 1 |
Ескертулер:
1) Үлгіні қолдану: 50-200 нг геномдық ДНҚ;0,1-10 нг плазмидті ДНҚ.
2) Mg2+концентрациясы: Бұл өнімде ПТР реакцияларының көпшілігіне жарамды 3 мМ MgCl2 бар.
3) Жылыту температурасы: Праймерлердің теориялық Tm мәнін қараңыз.Жасыту температурасын праймердің теориялық мәнінен 2-5 ℃ төмен орнатуға болады.
4) Ұзарту уақыты: Молекулярлық идентификация үшін 30 сек/кб ұсынылады.Гендерді клондау үшін, 60сек/кб ұсынылады.
Ескертпелер
1.Қауіпсіздігіңіз бен денсаулығыңыз үшін зертханалық халат пен жұмыс кезінде бір рет қолданылатын қолғап киіңіз.
2.Тек зерттеуге арналған!
