2×PCR Super Mix (бояғышпен)
2× ПТР Мастер Микс құрамында Taq DNA Polymerase, dNTPs және басқа ПТР талап етілетін компоненттер бар.Мастер-микс біздің теңшелген тұрақтандырғыштармен 4℃ температурада 3 ай бойы тұрақты.Алдын ала араластыру ерітіндісі әдеттегі ПТР үшін оңтайландырылған және ДНҚ үлгісі мен праймерлерді қосу арқылы пайдалануға дайын.ПТР өнімдерін алдын ала жүктелген бромофенол көк бояуы бар электрофорез үшін тікелей жүктеуге болады.Күшейтілген өнімдерде 3 '-dA шығуы бар және оларды Т векторына оңай клондауға болады.2×PCR Master Mix ПТР процедурасын жеңілдетеді және ластануды азайтады.
Сақтау шарттары
Өнімдерді -25℃~-15℃ температурада 2 жыл бойы сақтау керек.
Техникалық сипаттамалар
| Адалдық(Таққа қарсы) | 1× |
| Ыстық бастау | No |
| Аспалы | 3'-А |
| Полимераз | Так ДНҚ полимераза |
| Реакция пішімі | SuperMix немесе Master Mix |
| Реакция жылдамдығы | Стандартты |
| Өнім түрі | ПТР мастер-миксі (2x) |
Нұсқаулар
1.Реакция жүйесі
| Құрамдас бөліктер | Көлемі(мкл) |
| Үлгі ДНҚ | Қолайлы |
| 1-праймер (10 мкмоль/л) | 2 |
| 2-праймер (10 мкмоль/л) | 2 |
| 2 × ПТР мастер-миксі | 25 |
| ddH2O | 50-ге дейін |
2.Күшейту хаттамасы
| Цикл қадамдары | Температура (°C) | Уақыт | Циклдер |
| Бастапқы денатурация | 94 | 5 мин | 1 |
| Денатурация | 94 | 30 сек | 35 |
| Күйдіру | 50-60 | 30 сек | |
| Кеңейтім | 72 | 30-60 сек/кб | |
| Соңғы кеңейту | 72 | 10 мин | 1 |
Ескерту:
1) Үлгіні қолдану: 50-200нг геномдық ДНҚ;0,1-10 нг плазмидті ДНҚ.
2) Mg2+концентрациясы: Бұл өнімде ПТР реакцияларының көпшілігіне жарамды 3мМ MgCl2 бар.
3) Жылыту температурасы: праймерлердің теориялық Tm мәнін қараңыз.Жасыту температурасын праймердің теориялық мәнінен 2-5℃ төмен орнатуға болады.
4) Ұзарту уақыты: Молекулярлық идентификация үшін 30 сек/кб ұсынылады.Гендерді клондау үшін 60 сек/кб ұсынылады.
Ескертпелер
1.2× ПТР мастер-миксі бар ПТР өнімдері полиакриламидті гель электрофорезі үшін жарамсыз.
2.Қауіпсіздігіңіз бен денсаулығыңыз үшін зертханалық халат пен жұмыс кезінде бір рет қолданылатын қолғап киіңіз.
3.Ол ТЕК зерттеу мақсатында пайдаланылады!
