Вирустың ДНҚ/РНҚ экстракциясы жинағы
Жинақ (HC1009B) қан, сарысу, плазма және жағынды жуу сұйықтығы сияқты әртүрлі сұйықтық үлгілерінен жоғары таза вирустық нуклеин қышқылдарын (ДНҚ/РНҚ) жылдам шығарып, параллель үлгілерді жоғары өнімділікпен өңдеуге мүмкіндік береді.Жинақ бірегей кірістірілген суперпарамагниттік кремний негізіндегі магниттік моншақтарды пайдаланады.Бірегей буферлік жүйеде ақуыздар мен басқа қоспалардың орнына нуклеин қышқылдары сутегі байланыстары мен электростатикалық байланыс арқылы адсорбцияланады.Нуклеин қышқылдары адсорбцияланған магниттік түйіршіктер қалған ақуыздар мен тұздарды жою үшін жуылады.Төмен тұзды буферді пайдаланған кезде нуклеин қышқылдарын жылдам бөлу және тазарту мақсатына жету үшін магниттік моншақтардан нуклеин қышқылдары бөлінеді.Бүкіл операция процесі қарапайым, жылдам, қауіпсіз және тиімді және алынған нуклеин қышқылдары кері транскрипция, ПТР, qPCR, RT-PCR, RT-qPCR, келесі ұрпақ секвенциясы, биочипті талдау, т.б.
Сақтау шарттары
15~25℃ температурада сақтаңыз және бөлме температурасында тасымалдаңыз.
Қолданбалар
Қан, сарысу, плазма, жағынды элюент, тіндердің гомогенаты және т.б.
Эксперимент процесі
1. Үлгі өңдеу
1.1 Қан, сарысу және плазма сияқты сұйық үлгілердегі вирустар үшін: экстракция үшін қолданылатын 300 мкл үстіңгі зат.
2.2 Тампон үлгілері үшін: жағынды үлгілерін консервілеу ерітіндісі бар сынама алу түтіктеріне салыңыз, 1 минут бойы құйыңыз және экстракция үшін 300 мкл супернатант алыңыз.
1.3 Тіндік гомогенаттардағы, тіндерді сіңіретін ерітінділердегі және қоршаған орта үлгілеріндегі вирустар үшін: Үлгілерді 5 -10 минутқа қойып, экстракция үшін 300 мкл супернатант алыңыз.
2. Дайындау дайындыққұйылған реагент
Жинақтан алдын ала оралған реагенттерді алыңыз, магниттік моншақтарды қайта суспензиялау үшін төңкеріп, бірнеше рет араластырыңыз.Реагенттер мен магнитті моншақтарды ұңғыма түбіне түсіру үшін пластинаны ақырын шайқаңыз.Пластинаның бағытын растаңыз және тығыздағыш алюминий фольганы мұқият жыртып алыңыз.
Δ Сұйықтықтың төгілуін болдырмау үшін тығыздағыш пленканы жыртқанда дірілден аулақ болыңыз.
3. Пайдалану автомататикалық құрал
3.1 96 терең ұңғыма тақтасының 1 немесе 7-бағандарындағы ұңғымаларға 300 мкл үлгіні қосыңыз (тиімді жұмыс ұңғымасының күйіне назар аударыңыз).Үлгінің кіріс көлемі 100-400 мкл үйлесімді.
3.2 96 шұңқырлы терең ұңғыма тақтасын нуклеин қышқылдарының экстракторына салыңыз.Магниттік жолақтардың жеңдерін киіңіз және олардың магниттік шыбықтарды толығымен орап алғанына көз жеткізіңіз.
3.3 Автоматты шығару үшін бағдарламаны келесідей орнатыңыз:
3.4 Экстракциядан кейін 96 терең ұңғыма тақтасының 6 немесе 12-бағандарынан элюентті (ұңғыманың тиімді жұмыс жағдайына назар аударыңыз) таза нуклеазасыз центрифуга түтігіне ауыстырыңыз.Оны бірден қолданбасаңыз, өнімдерді -20℃ температурада сақтаңыз.
Ескертпелер
Тек зерттеуге арналған.Диагностикалық процедураларда қолдануға болмайды.
1. Алынған өнім ДНҚ/РНҚ болып табылады.Операция кезінде РНҚ-ның RNase арқылы деградациясын болдырмауға ерекше назар аудару керек.Қолданылатын ыдыстар мен сынама алғыштар арнайы болуы керек.Барлық түтіктер мен тамшуыр ұштары зарарсыздандырылған және DNase/RNase болмауы керек.Операторлар ұнтақсыз қолғап пен маска киюі керек.
2. Қолданар алдында нұсқаулықты мұқият оқып шығыңыз және нұсқаулыққа қатаң сәйкес жұмыс жасаңыз.Үлгіні өңдеу өте таза орындықта немесе биологиялық қауіпсіздік шкафында жүргізілуі керек.
3. Автоматты нуклеин қышқылын экстракциялау жүйесін қолданар алдында және одан кейін 30 минут бойы ультракүлгін сәулемен дезинфекциялау керек.
4. Экстракциядан кейін элюентте магниттік түйіршіктердің іздері қалуы мүмкін, сондықтан магниттік моншақтарды сорып алмау керек.Магниттік моншақтар сорылатын болса, оны магниттік тіреуішпен алып тастауға болады.
5. Реагенттердің әртүрлі партиялары үшін арнайы нұсқаулар болмаса, оларды араластырмаңыз және жинақтардың жарамдылық мерзімі ішінде пайдаланылғанына көз жеткізіңіз.
6. Барлық үлгілер мен реагентті дұрыс тастаңыз, барлық жұмыс беттерін 75% этанолмен мұқият сүртіңіз және дезинфекциялаңыз.
