DNase I (Rnase Free) (2u/ul)
Мысықтың №: HC4007B
DNase I - бір немесе екі тізбекті ДНҚ-ны қорыта алатын эндонуклеаза.Ол 5'-фосфат тобы және 3'-ОН тобы бар моно- және олигодеоксинуклеотидтерді өндіру үшін фосфодиэфирлік байланыстарды гидролиздей алады.DNase I оңтайлы жұмыс рН диапазоны 7-8.DNase I белсенділігі Са-ға тәуелді2+және СО сияқты екі валентті металл иондарымен белсендірілуі мүмкін2, Mn2+, Zn2+, т.б. Mg қатысуымен2+, DNase Мен кез келген қос тізбекті ДНҚ учаскесін кездейсоқ ажырата аламын;Мн қатысуымен болған кезде2+, DNase I бір жерде қос тізбекті ДНҚ-ны ыдыра алады, 1-2 нуклеотидтері шығып тұрған доғал ұштарды немесе жабысқақ ұштарды қалыптастырады.Оны әртүрлі РНҚ үлгілерін өңдеу үшін пайдалануға болады.
Құрамдас бөліктер
Аты | 1KU | 5KU |
Рекомбинантты DNaseI (RNase жоқ) | 500 мкл | 5 × 500 мкл |
DNase I реакция буфері (10×) | 1 мл | 5 × 1 мл |
Сақтау шарттары
Бұл өнімді -25~-15℃ температурада 2 жыл бойы сақтау керек.Қайталанатын мұздату-ерітуден аулақ болыңыз.
Нұсқаулар
Тек анықтама үшін РНҚ үлгілерінен ДНҚ-ны жоюға қолданылады.
1. Келесі реакция жүйесін дайындау үшін RNase жоқ центрифуга түтіктерін және тамшуыр ұштарын пайдаланыңыз:
Құрамдас бөліктер | Көлемі (мкл) |
DNase I реакция буфері (10×) | 1 |
Рекомбинантты DNasel (RNase жоқ) | 1 |
РНҚ | X |
RNase жоқ ddH2O | 10-ға дейін |
2. Реакция шарттары төмендегідей: 37℃, 15-30 минуттан кейін 2,5 мМ ЭДТА ерітіндісінің соңғы концентрациясын қосыңыз және жақсылап араластырыңыз, содан кейін 65℃ 10 минут бойы.Өңделген үлгіні келесі RT-PCR немесе RT-qPCR тәжірибелері үшін және т.б.
Ескертпелер
1. DNase l физикалық денатурацияға сезімтал;Араластыру кезінде пробирканы ақырын төңкеріңіз жәнежақсылап шайқаңыз, қатты шайқамаңыз.
2. Пайдаланылған кезде ферментті мұз жәшігінде немесе мұз ваннасында сақтау керек және оны қолданғаннан кейін бірден -20℃ температурада сақтау керек.
3. Бұл өнім тек зерттеуге арналған.
4. Қауіпсіздігіңіз үшін зертханалық халатпен және бір рет қолданылатын қолғаппен жұмыс жасаңыз.